يتم توفير كل الببتيد البحثي تقريبًا كمسحوق مجفف بالتجميد ويجب إذابته قبل الاستخدام - إعادة تكوينه. يشرح هذا الدليل خطوة بخطوة كيفية إعادة تكوين الببتيدات في المختبر، للبحث فقط ودون أي ضجة.
إعادة التكوين = إذابة مسحوق الببتيد المجفف بالتجميد في الماء المثبط للجراثيم. دع كلاهما يصل إلى درجة حرارة الغرفة، وقم بتطهير السدادات، وأضف الماء ببطء إلى أسفل الجدار، وحركه بلطف (لا تهزه) وخزنه في الثلاجة. كمية الماء التي تضيفها تحدد التركيز - احسبها بدقة باستخدام حاسبة الببتيد. لأغراض البحث فقط.
ماذا يعني إعادة تشكيل الببتيدات؟
إعادة التكوين هي إذابة مسحوق الببتيد المجفف بالتجميد (المجفف بالتجميد) في سائل معقم، بحيث يتم تكوين محلول بتركيز معروف. يتم توفير الببتيدات مجففة بالتجميد لأنها أكثر استقرارًا في شكل مسحوق. مرة واحدة فقط في الحل يمكن استخدامها للبحث. السائل الأكثر استخداما هو المياه الجراثيم.
ماذا تحتاج لإعادة البناء؟
لإعادة البناء النظيف تحتاج إلى أربعة أشياء: الببتيد المجفف بالتجميد، ومذيب، وحقنة ومطهر.
- الببتيد البحثي في قارورة (مسحوق مجفف بالتجميد).
- المياه البكتيرية كما المذيب.
- محاقن الأنسولين (U-100) لقياس دقيق.
- مناديل الكحول لتطهير السدادات المطاطية.
ستجد كل شيء معًا في مختبر وملحقاته فئة.
كيفية إعادة تكوين الببتيدات في 6 خطوات
- 1دعها تصل إلى درجة حرارة الغرفة
دع القارورة التي تحتوي على المسحوق والماء المثبط للجراثيم تصل إلى درجة حرارة الغرفة أولاً. يمكن أن تؤدي إضافة سائل بارد على الفور إلى وضع ضغط غير ضروري على الببتيد.
- 2تطهير السدادات
امسح السدادة المطاطية لكلا القارورتين باستخدام منديل كحول واتركها حتى تجف.
- 3اسحب الماء
ارسم الكمية المطلوبة من الماء المثبط للجراثيم باستخدام حقنة الأنسولين. المقدار الذي تضيفه يحدد التركيز.
- 4إضافته إلى أسفل الجدار
أدخل الماء ببطء، موجهًا نحو الجدار الزجاجي للقارورة، وليس مباشرة على المسحوق. وهذا يمنع الرغوة والضرر.
- 5دوامة بلطف
قم بتدوير القارورة بعناية حتى يذوب المسحوق بالكامل. لا تهز: الهز القوي يمكن أن يلحق الضرر بالببتيد.
- 6التسمية والتخزين
لاحظ تاريخ إعادة التركيب ورقم الدفعة على القارورة وقم بتخزين المحلول مبردًا (2-8 درجة مئوية) على الفور.
ما هي المياه التي تستخدمها؟
يعتبر الماء المثبط للبكتيريا هو الاختيار القياسي لإعادة التركيب، لأن المادة الحافظة تسمح باستخدامه لعدة أيام من قارورة واحدة. يقارن الجدول أدناه المذيبات الشائعة.
إعادة البناء هو إجراء مختبري موصوف هنا فقط في أ سياق البحث. الببتيدات ليسينتا هي حصرا للأغراض المختبرية والبحثية - ليس للاستهلاك البشري أو الحيواني، وليس دواءً ولا نصيحة طبية أو جرعات.
حساب التركيز والوحدات
التركيز هو قوة القارورة مقسومة على الماء المضاف (ملجم/مل) - وهذا يحدد عدد الوحدات التي تسحبها حقنة الأنسولين. بدلا من الحساب باليد، استخدم حاسبة الببتيد: أدخل منتجك والماء والكمية المطلوبة وسترى الوحدات والتركيز وعدد الجرعات لكل قارورة على الفور. تعمل الآلة الحاسبة أيضًا بشكل عكسي - مقدار الماء الذي تحتاج إلى إضافته لعدد كامل من الوحدات.
كيف يمكنك تخزين الببتيد المعاد تشكيله؟
قم بتخزين المحلول مبردًا (2-8 درجة مئوية) واستخدمه عمومًا خلال بضعة أسابيع. يتم استخدام الماء المثبط للبكتيريا خلال 28 يومًا بعد أول ثقب، وفقًا للملصقات القياسية. أبقِ القارورة بعيدًا عن الضوء المباشر، وتحقق من وضوح المحلول قبل الاستخدام ولاحظ تاريخ إعادة التركيب. قراءة المزيد من المعلومات الأساسية عن الببتيدات الانتعاش في دليل الاسترداد وفي ما هو BPC-157.
الأسئلة المتداولة حول إعادة البناء
ماذا يعني إعادة تكوين الببتيد؟
إعادة التركيب هي إذابة مسحوق الببتيد المجفف بالتجميد (المجفف بالتجميد) في سائل معقم — عادة ماء مثبط للجراثيم. وينتج عن ذلك محلول بتركيز معروف يمكن استخدامه في البحث. إنه إجراء مختبري قياسي، لأغراض البحث فقط.
ما هي كمية الماء الجراثيم التي يجب أن أضيفها؟
الأمر متروك لك: كمية الماء التي تضيفها تحدد التركيز (مجم/مل). المزيد من الماء = تركيز أقل ووحدات أكثر في كل سحب. استخدم حاسبة الببتيد لتحسب بالضبط كمية الماء التي تتوافق مع التركيز المطلوب أو عدد الوحدات.
ما الماء الذي أستخدمه لإذابة الببتيدات؟
في الأبحاث، يُستخدم الماء المثبط للجراثيم عادةً: ماء معقم يحتوي على 0.9% من كحول البنزيل كمادة حافظة، مما يحافظ على القارورة صالحة للاستخدام لعدة أيام بعد ثقبها. الماء المعقم بدون مواد حافظة مخصص للاستخدام مرة واحدة.
هل يجب أن أهز القارورة بعد إضافة الماء؟
لا، دع الماء يتدفق على جدار القارورة وحرك القارورة بلطف حتى يذوب المسحوق. يمكن أن يؤدي الاهتزاز القوي إلى إتلاف الببتيد؛ دوامة لطيف يكفي.
ما هي مدة بقاء الببتيد المعاد تكوينه؟
قم بتخزين المحلول مبردًا (2-8 درجة مئوية) واستخدمه عمومًا خلال بضعة أسابيع. يتم استخدام الماء المثبط للبكتيريا خلال 28 يومًا بعد أول ثقب، وفقًا للملصقات القياسية. لاحظ دائمًا تاريخ إعادة التركيب على القارورة.
