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研究与安全

什么是质谱分析?确认肽的身份

经过 利森达研究团队·最后更新 ·7 最短阅读时间

纯度百分比可以告诉您样品中有多少是目标分子,但不能告诉您该目标分子是否真的在小瓶中。质谱分析法回答了这个问题。本指南解释了它的工作原理以及为什么这两种测量相互需要。

长话短说

质谱法对分子进行称重:它测量 质荷比 电离粒子的数量,以及分子量。如果匹配序列, 身份已确认。它不产生纯度百分比——这仍然是 HPLC 的工作。

什么是质谱分析?

质谱 (MS) 是一种电离分子,然后根据质荷比 (m/z) 对它们进行分类的技术。 结果是一个谱图:沿 m/z 轴的一系列信号,其中信号的位置揭示了相应离子的质量。

对于肽,通常使用软电离技术,通常是电喷雾电离(ESI)。软意味着分子进入气相并获得电荷而不会分解。当完整肽的分子量成为问题时,这正是您想要的。

分子量是如何得出的?

根据测量的 m/z 值和电荷数计算出分子量,然后与氨基酸序列暗示的重量进行比较。 这两个人必须以微弱的差距达成一致。如果偏离得更远,小瓶中就会出现与标签所示内容不同的东西——或者不仅如此。

在 ESI 下,肽通常会拾取多个电荷,因此同一分子会出现在光谱中的多个位置:其质量除以一个电荷、除以两个电荷、除以三个电荷。这不是污染,而是该技术的一个特性,正是该级数使计算变得可靠。

规格中的分子量 产品页面 是序列的理论值。特定批次的测量值位于 证书.

HPLC 和 MS:测量什么?

这两种技术回答了不同的问题,并且只有在这两种技术都完成后才能对批次进行表征。

HPLC质谱分析
答案样品中有多少是目标分子?这是正确的分子吗?
措施分离后峰面积离子的质荷比
生产纯度百分比分子量等特性
没有说任何关于它到底是什么物质样品的纯度如何

这就是为什么一份严肃的分析证书包含这两者。有关分离方面的更多信息,请参见 什么是高效液相色谱法;我们的门槛已经开启 质量标准.

质谱无法告诉您什么

质谱无法区分具有相同分子量的物质。 具有相同分子式但结构不同(包括氨基酸顺序交换)的两个分子重量完全相同。要想看清这一点,需要进行碎片化,即分子被故意分解,碎片揭示了序列。

就像纯度测量一样,光谱并不能说明无菌、内毒素或任何应用的适用性。为什么我们让第三方进行这些测量是关于 贾诺希克分析公司;通过检查特定批次 验证批号.

此信息本质上是一般性和教育性的。 LYSENTA 提供研究肽 仅用于实验室和研究目的。不适合人类或动物食用,不是药物,也不是医疗建议。

有关质谱分析的常见问题

质谱分析对肽有什么作用?

质谱法测量电离分子的质荷比,并由此得出分子量。如果测得的重量与氨基酸序列所暗示的重量相匹配,则可以确认目标分子位于小瓶中。

高效液相色谱法和质谱法有什么区别?

HPLC 可分离样品的成分并确定目标肽的百分比(多少)。质谱法确认分子身份和分子量——什么。它们测量不同的事物并且不会相互替代。

为什么单个肽的质谱中有多个峰?

肽在电离过程中通常会带上多个电荷。然后,一个分子出现在光谱中的几个位置,每次都是其质量除以电荷数。从该系列中计算出单个分子量。

质谱法能证明肽是纯净的吗?

不会。光谱可以确认同一性,而不是纯度百分比。两种具有相同分子量的物质无法通过普通测量来区分。 HPLC 产生纯度数据。

仅供研究使用。 仅用于实验室和研究目的。不适合人类或动物食用;不是药物,也不构成医疗建议。